Prática 2 - Extração de DNA

“Material vegetal como fonte de DNA tem sido extensamente usado em sala de aula para práticas em laboratório. Este trabalho tem por objetivo discutir importantes aspectos relacionados a problemas práticos do isolamento e da identificação de DNA obtido de plantas durante aulas de Ciências e Biologia. Baseado em respostas de professores de educação básica, foi detectada grande dificuldade na identificação de camadas de pectinas e o verdadeiro DNA. Vários aspectos concernentes ao correto discernimento entre DNA e pectina são discutidos.” (FURLAN. et al, 2011)

Obs.: O figo-da-índia é o fruto da palma, uma espécie de cacto comum nas regiões semiáridas. Originado do México, este furto é rico em fibras, vitaminas A e C, e minerais como o ferro. Além de possuir utilidades culinárias, o figo-da-índia pode aliviar o mal-estar por obstrução e pode ser satisfatório no combate as bactérias. Também é um fruto indicado para a cura de câncer, hemorroidas, gangrena, e enfermidades do fígado.

Materiais para isolamento de DNA vegetal

·         Fruta escolhida (figo-da-índia);

·         Saco plástico;

·         Copo transparente;

·         Filtro de papel;

·         Coador;

·         Detergente;

·         Sal de cozinha;

·         Álcool gelado;

·         Palito de madeira;

·         Água morna.

Procedimento

·         Retire a casca de 1 ou 2 figo-da-índia e coloque dentro do saco plástico já, em pedaços, e amasse bem.

·         Adicione o detergente (1 colher de chá) e uma pintada de sal ao macerado no saco. Amasse mais e misture bem.

·         Passe a mistura pelo coador com o filtro de papel para o copo.

·         Adicione o álcool ao suco da fruta coado (aproximadamente o dobro do suco).

·         Mexa bem a mistura e aguarde um pouco. Observe a formação de uma “nuvem branca”. É onde está o DNA.

·         Para melhor visualização, utilize o palito e retire o precipitado da solução.

Discussão

a) Por que amassar bem os frutos no início do procedimento?

b) Quais são as funções do detergente e do sal na solução de extração?

c)  O que ocorre quando adicionamos o álcool gelado na amostra?

Referências Bibliogáficas:

FURLAN, C. M. ALMEIDA, A. C. ROGRIGUES, C.D.N. TANIGUSHI, D. G. SANTOS, D. Y. A. C. MOTTA, L.B. CHOW, F. Extração de DNA Vegetal: O que Estamos Realmente Ensinando em Sala de Aula?  Vol. 33, N° 1, FEVEREIRO 2011.

Disponível em: http://biomomento.blogspot.com.br/2011/02/extracao-de-dna.html. Acessado em 13/01/13.

Disponível em: http://amoarvores.blogspot.com.br/2008/02/figo-da-india-frutos.html. Acessando em 13/01/13.

Disponível em: http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc33_1/05-RSA6409.pdf. Acessado em: 14/01/13.

Disponível em: http://g1.globo.com/platb/espiral/2008/08/29/a-primeira-descoberta-do-dna/ Acessado em: 15/01/13.

Disponível em: http://bioblog-itarare.blogspot.com.br/2011/04/extracao-do-dna-do-morango.html. Acessado em: 15/01/13.

Por Sivoneide   Maria

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